(1)通过裂解过程增殖载体
通过噬菌体的增殖,从中提取噬菌体DNA
2)载体与外源DNA的酶切
插入型载体来说,载体被酶切后,很容易自身连
接,须对载体的进行去磷酸化。
置换型载体,切割后形成左臂、填充片断、右臂
,填充片断的存在会影响连接效率,必须纯化左臂和右臂 (3)外源DNA与载体的连接
通过载体的粘性末端,将载体连接成多联体
以利于将两个cos位点之间的片断装入噬菌体颗粒
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