4.13

核心围绕酶切、连接、转化、筛选四大步骤记忆：

1. 关键工具酶：限制性内切酶负责切割，DNA 连接酶负责拼接，反转录酶可获取 cDNA；
2. 载体必备条件：有复制起点、多*位点、筛选标记，常用质粒、噬菌体；
3. 基本流程：目的基因获取→酶切载体与目的基因→连接形成重组 DNA→导入宿主细胞→筛选阳性*；
4. 重点区分原核 / 真核表达差异，牢记筛选原理（抗生素、蓝白斑等）。